Zestawy szybkich testów kasetowych na przeciwciała HCV
JEDEN KROK TESTU HCV (krew pełna/surowica/osocze)
STRESZCZENIE
Ogólną metodą wykrywania zakażenia HCV jest obserwacja obecności przeciwciał przeciwko wirusowi metodą EIA, a następnie potwierdzenie metodą Western Blot.Jednoetapowy test na HCV jest prostym, wizualnym testem jakościowym, który wykrywa przeciwciała w ludzkiej krwi pełnej/surowicy/osoczu.Test opiera się na metodzie immunochromatograficznej i może dać wynik w ciągu 15 minut.
PRZEZNACZENIE
Jednoetapowy test na HCV to szybki test immunochromatograficzny wzmocniony złotem koloidalnym, służący do jakościowego wykrywania przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV) w ludzkiej krwi pełnej/surowicy/osoczu.Ten test jest testem przesiewowym i wszystkie pozytywne wyniki należy potwierdzić za pomocą alternatywnego testu, takiego jak Western Blot.Test jest przeznaczony wyłącznie do użytku przez pracowników służby zdrowia.Zarówno test, jak i jego wyniki są przeznaczone do użytku wyłącznie przez pracowników służby zdrowia i prawników, chyba że przepisy obowiązujące w kraju stosowania stanowią inaczej.Testu nie należy używać bez odpowiedniego nadzoru.
ZASADA PROCEDURY
Test rozpoczyna się od nałożenia próbki na studzienkę i natychmiastowego dodania dostarczonego rozcieńczalnika do próbki.Koniugat antygen HCV-złoto koloidalne osadzony w podkładce próbki reaguje z przeciwciałem HCV obecnym w surowicy lub osoczu, tworząc kompleks koniugat/przeciwciało HCV.Gdy mieszanina może migrować wzdłuż paska testowego, kompleks koniugat/przeciwciało HCV jest wychwytywany przez białko A wiążące przeciwciało, unieruchomione na membranie, tworząc kolorowy pasek w obszarze testowym.Próbka ujemna nie daje linii testowej ze względu na brak kompleksu koniugat złota koloidalnego/przeciwciało HCV.Antygeny użyte w teście to rekombinowane białka odpowiadające regionom wysoce immunoreaktywnym HCV.Kolorowy pasek kontrolny w obszarze kontrolnym pojawia się na końcu procedury testowej, niezależnie od wyniku testu.To pasmo kontrolne jest wynikiem wiązania koniugatu złota koloidalnego z przeciwciałem anty-HCV unieruchomionym na membranie.Linia kontrolna wskazuje, że koniugat złota koloidalnego jest funkcjonalny.Brak pasma kontrolnego oznacza, że test jest nieważny.
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI I MATERIAŁY
Urządzenie testowe pakowane pojedynczo w folię ze środkiem osuszającym
• Plastikowy zakraplacz.
• Rozcieńczalnik próbki
• Wkładka do pakietu
MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE DOSTĘPNE
Kontrole pozytywne i negatywne (dostępne jako osobna pozycja)
PRZECHOWYWANIE I STABILNOŚĆ
Zestawy testowe należy przechowywać w temperaturze 2–30°C w szczelnie zamkniętym woreczku i w suchych warunkach.
OSTRZEŻENIA I ŚRODKI
1) Wszystkie pozytywne wyniki należy potwierdzić metodą alternatywną.
2) Traktuj wszystkie próbki jak potencjalnie zakaźne.Podczas obchodzenia się z próbkami należy nosić rękawice i odzież ochronną.
3) Wyroby użyte do badań należy przed wyrzuceniem poddać autoklawowaniu.
4) Nie używaj materiałów zestawu po upływie ich daty ważności.
5) Nie zamieniać odczynników pochodzących z różnych serii.
POBIERANIE PRÓBEK I PRZECHOWYWANIE
1) Pobieraj próbki krwi pełnej/surowicy/osocza zgodnie z regularnymi procedurami laboratorium klinicznego.
2) Przechowywanie: Pełnej krwi nie można zamrażać.Próbkę należy przechowywać w lodówce, jeśli nie zostanie wykorzystana tego samego dnia pobrania.Próbki należy zamrozić, jeśli nie zostaną wykorzystane w ciągu 3 dni od pobrania.Przed użyciem należy unikać zamrażania i rozmrażania próbek więcej niż 2-3 razy.Do próbki można dodać 0,1% azydku sodu jako środek konserwujący, bez wpływu na wyniki testu.
PROCEDURA TESTU
1) Używając dołączonego plastikowego zakraplacza do próbki, odmierzyć 1 kroplę (10 μl) krwi pełnej/surowicy/osocza do okrągłej studzienki na próbkę karty testowej
2) Dodać 2 krople rozcieńczalnika próbki do studzienki próbki, natychmiast po dodaniu próbki, z fiolki z rozcieńczalnikiem z zakraplaczem (lub całą zawartość pojedynczej ampułki testowej).
3) Zinterpretuj wyniki testu po 15 minutach.
Uwagi:
1) Aby wynik testu był ważny, konieczne jest zastosowanie wystarczającej ilości rozcieńczalnika próbki.Jeżeli po minucie w okienku testowym nie zostanie zaobserwowana migracja (zwilżenie membrany), należy dodać jeszcze jedną kroplę rozcieńczalnika do studzienki próbki.
2) W przypadku próbki o wysokim poziomie przeciwciał HCV wyniki pozytywne mogą pojawić się już po jednej minucie.
3) Nie interpretuj wyników po 20 minutach
ODCZYT WYNIKÓW TESTU
1)Pozytywny: Na membranie pojawia się zarówno fioletowo-czerwony pasek testowy, jak i fioletowo-czerwony pasek kontrolny.Im niższe stężenie przeciwciał, tym słabsze pasmo testowe.
2) Negatywny: Na membranie pojawia się jedynie fioletowo-czerwony pasek kontrolny.Brak paska testowego oznacza wynik negatywny.
3)Nieprawidłowy wynik:Niezależnie od wyniku testu, w obszarze kontrolnym zawsze powinno znajdować się fioletowo-czerwone pasmo kontrolne.Jeśli nie widać pasma kontrolnego, test uważa się za nieważny.Powtórz test, używając nowego urządzenia testowego.
Uwaga: Lekko rozjaśnione pasmo kontrolne w przypadku bardzo silnych próbek pozytywnych jest zjawiskiem normalnym, o ile jest wyraźnie widoczne.
OGRANICZENIE
1) W tym teście można używać wyłącznie czystej, świeżej, sypkiej krwi pełnej/surowicy/osocza.
2) Najlepsze są świeże próbki, ale można użyć próbek zamrożonych.Jeżeli próbka została zamrożona, należy ją rozmrozić w pozycji pionowej i sprawdzić płynność.Pełnej krwi nie można zamrażać.
3) Nie mieszaj próbki.Włóż pipetę tuż pod powierzchnię próbki, aby pobrać próbkę.
